外泌體(Exosome)是由不同細胞分泌的直徑 30-150nm 的胞外膜性囊泡。外泌體內容物豐富,包括蛋白質、脂質和核酸等,在細胞間信息交流中發揮著重要作用,并與多種疾病的發生、發展、治療及預后密切相關。
作為天然的胞間信息載體,外泌體免疫原性低,生物相容性高,在人體血液中比較穩定。能夠利用增強滲透滯留效應(Enhanced Permeation and Retention effect,EPR),有選擇性的滲透和滯留在腫瘤或炎癥組織部位,可穿透血腦屏障等。不僅可以通過其內源內容物直接對受體細胞進行治療,也可以作為藥物載體,遞送化學藥物、蛋白質、多肽及基因藥物,在醫療領域具有巨大的應用潛力。
為了增強外泌體的治療效果,降低對正常細胞的毒害,需提高外泌體的靶向遞送能力,目前科研常用方法是基因改造分泌外泌體的細胞,利用重組克隆質粒,在細胞中表達靶向蛋白或多肽-外泌體膜蛋白復合體,收集釋放的外泌體,來獲得靶向外泌體,但該方法修飾效率低,且部分細胞轉染困難,難以大規模制備。生物素和鏈霉親和素之間具有極高的親和能力,反應高度專一,形成復合物的解離常數很小,呈不可逆反應性,產物穩定性高,目前生物素-親和素系統在生物領域已成為了一種通用普適的研究方法。
本試劑盒首先通過化學連接的方法,將生物素偶聯在外泌體表面,通過 SEC 分子排阻柱去除游離的生物素,得到大量純凈的生物素化外泌體。生物素化的外泌體先通過與鏈霉親和素結合(含有 4 個生物素結合位點),然后再與帶有生物素標記的蛋白、多肽、小分子和核酸進行連接,最后實現蛋白、多肽、小分子、核酸在外泌體表面的修飾(靶向)。
本試劑盒反應條件溫和,生理條件下即可發生反應,反應特異性好,無有害副產物,不損傷外泌體膜結構,也不影響外泌體的生物活性和功能,為外泌體表面修飾提供了一個高效、通用的修飾平臺。